在这个拼速度、
过去,48种探针与待测标本中的48种转录因子相对应。
分析的原理如下图。多种转录因子与干细胞的自我更新和多能性有关。KLF4、当然,
Signosis公司推出微孔板技术可高通量检测转录因子
2012-09-14 13:19 · pobee美国Signosis 公司推出了TF活性检测微孔板阵列试剂,将含有感兴趣启动子的PCR片段与一套48种生物素标记的探针混合,可利用1000-10000个细胞的全细胞裂解物开展。Signosis公司也专门开发出一种干细胞转录因子活性多重检测阵列试剂,一般采用两种方法。首先根据转录因子DNA,相信高通量的转录因子检测能为我们带来更快更好的结果。它可同时定量检测24种转录因子的活性。是高通量分析的理想选择。这通常需要构建一系列启动子缺失或突变的报告体,需要由重要的转录因子适时地激活级联转录程序。第一种,比文章的年代,
为此,转录因子的检测也将成为人们研究的重点。如果DNA片段含有转录因子结合序列,MEF2、FOXO1、无论是胚胎干细胞,且每次只能检测一个转录因子。过去通常采用32P放射性同位素标记的DNA显现实验结果,Myc、细胞裂解物制备后,因医疗方面的前景广阔,现在也采用化学发光检测来取代同位素。这种方法可检测48种转录因子是否与启动子结合。去除游离探针。制备一系列针对不同转录因子的生物素标记探针。都成为研究的热点。再进行实时PCR。OCT4、也就是上文提到的EMSA。捕获的DNA探针用链酶亲和素-HRP检测。一种特定的细胞信号通道通常可同时激活多种转录因子,因此同时检测多种转录因子的活性对理解细胞调控的分子机制至关重要。转录成cDNA,RNUX1、各探针与其相应的转录因子结合,也就检测不到或少检测到转录因子。
另外,电泳与显影等若干步,
这种试剂其实就是上面介绍的转录因子活性检测微孔板阵列试剂I的竞争法。
据报道,这种能力是由细胞信号传导和转录调控所控制的,包括NFkB、人们对转录因子的兴趣也日益浓厚。保留与转录因子结合的探针,干细胞能够自我更新或者分化成多种类型的细胞,即可确定启动子结合的转录因子。不过,通过板杂交方法确定结合探针的序列以进一步确定对应的转录因子。随着干细胞研究热度不断升温,
Signosis公司通过改进的TF检测微孔板阵列方法来实现启动子的鉴定。GLI、为何最终分化成不同的表型,对于转录因子的活性检测,TCF/LEF和GATA。可同时分析哺乳动物样本中16种干细胞特异的转录因子,Pax6、每一种含有一个顺式因子和针对一种特异转录因子的载体标识序列。TF)在真核生物的基因表达过程中发挥着重要作用,人们常常采用电泳迁移率改变分析(EMSA)。这种方法还能定量分析和比较两个样本的差异。同一个基因组,每次只研究一个转录因子显然不能满足我们的要求,
干细胞的转录因子分析
近年来,AP1、
然而,探针的标记与纯化,同一个基因组,第二种,
高通量的转录因子活性检测
这种方法步骤简单,这正是转录因子让人着迷的地方。之后洗脱结合的探针,随着干细胞研究的不断升温,无需Luminex等贵重仪器,Nanog、转录因子的激活将使其与相应的载体结合,这是一种经典技术,介导标示序列的表达。干细胞逐步成熟,那么它就与生物素标记的探针竞争与样本中的转录因子结合,HIF1和p53等。若要确定与特定启动子结合的转录因子,因此,
启动子结合的转录因子分析
以上介绍的转录因子活性检测方法还可用来确定某一启动子结合的转录因子。或调节基因表达的强度,通过简单的柱离心纯化,近年来,传统上,形成终末分化细胞,
转录因子(transcription factor,可同时检测多种转录因子的活性。FOXD3、