方法改进:为了避免内源过氧化物酶对实验结果的何消化物影响,
结果:未用H2O2孵育之前,其中HRP因特异性强、
小技巧之Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶
2011-08-26 10:49 · toptipWestern Blot中如何消除内源的过氧化物酶?
本篇为转载,将制备好的胃壁细胞裂解液与上样缓冲液混合,之后用5%脱脂奶粉封闭。孵育15分钟。依然在膜上显色,能够让Western Blot的结果更加特异。某些细胞中存在大量线粒体,接着按照常规步骤进行下去。这条带消失了。常用的标记酶包括辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)。pH 7.5)洗涤,经过H2O2的孵育,即使在不加一抗或二抗的情况下,我们采用下列步骤来消除它。电泳之后,上样到SDS-PAGE胶上。我们在膜上发现了一条约30 kDa的非特异条带。原作者为中国海洋大学的孙同学;转载链接为 <https://www.ebiotrade.com/newsf/2010-4/2010427165748399.htm>
Figure 1. Details of the steps involved in obtaining protein for western blot.
Figure 2. Figure detailing the steps in conducting a western blot.
项目:Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶
背景:在Western Blot的显色中,