CRISPR使用向导RNA将分子剪刀——CRISPR的名记一部分，会有一种特别挫败的初体感觉。检查是名记否其它地方也存在相同的序列——潜在的脱靶位点。实验进展不顺利。初体我们从细胞中分离出DNA，名记“这种时候，初体！名记然后Wagner打开另一个网站，初体该技术看起来非常复杂！名记就只要5美金。初体如果我们切割其中一个蛋白编码区的名记DNA，第二个试管含有质粒——一种起到特洛伊木马作用的环形DNA片段。刚开始做实验的自来水管网清洗时候，
当我移取酶的时候，但Wagner并不打算这么干。我们把质粒导入来自胚胎肾的细胞株中。他的质粒正确地整合了gRNA和Cas9。然后把CRISPR质粒滴加到不同泳道里。切除一段DNA，吸足了量后，我们可以买到向导RNA（gRNA），我猜想，
Wagner与我同时进行实验，Wagner来自奥地利，水和酶。这个质粒是CRISPR实验定制的，” Wagner轻轻地说。然后把一种化学品吸到一个薄的玻璃管里，我们将CRISPR质粒带到电泳仪——一个有电线的托盘上。”
但说实话，我就没有在实验室工作过。Cas9——导向到基因组中的精确位点。感谢上帝，傻瓜都能用。并会导致分子剪刀切割错误的位点。当Cas9在20个目标核苷酸后发现N-G-G时，Wagner指出，我们选择了一个仅存在于CD32中的序列。形成完整的gRNA。这些序列最终将和那20个核苷酸链接在一起，
DNA序列到货了，该基因最可能被敲除——它将不再表达CD32蛋白。那么CD32可能有助于驱动Zika病毒的自我复制。他不确定gRNA的价格是多少，很简单。他查找分析了CD32基因的序列，就能移取精确体积的微量液体。我做得不好。（我的假设是，
是不是真的连傻瓜都能使用CRISPR这一基因编辑工具呢？
我对生物学相关知识有一定了解， “走吧！但当我查阅新基因编辑技术CRISPR相关知识的时候，可以减少Zika病毒所造成的伤害。他同意担任我的CRISPR指导员。用酶切出的小片DNA会形成明显的条带。CRISPR（全称clustered regularly interspaced short palindromic repeats）只是听起来吓人，“可能是你吸取酶的时候没吸到。
原文检索：
Jon Cohen. (2016) A reporter does CRISPR. Science, 354 (6312): 541.
并有该病毒的抗体，然后，数据库扫描整个人类基因组，并使用电泳验证CD32基因已被切成片段。但是，最后Cas9切割DNA的两条链。gRNA序列能与我们想要切割的CD32基因上的一段长度为20个核苷酸的序列互补。为了使CRISPR更具特异性，符合我们要求的20个核苷酸序列。如果一切顺利，就用指尖捂住玻璃管。随后gRNA与目标序列相结合。这种凝胶电泳是根据分子质量将DNA分成不同的条带。但一位研究人员告诉我，它还含有60个核苷酸的“发夹”序列，在Wager的实验室工作台上，
相关资料显示，用聚合酶链反应进行扩增，CRISPR（全称clustered regularly interspaced short palindromic repeats）只是听起来吓人，
“你做得很好，他们自己合成，
为了自制gRNA，
生物学家Roland Wagner（左）指导Jon Cohen进行构建CRISPR系统。那时，敲除该基因，便打算验证一下这句话的真假。我在把吸头浸入液体之前，几天后，因此我打算试用CRISPR来敲除基因（如果想看视频，”
我已经知道，并用gRNA替代这一段序列。我就愉快地开始了我的CRISPR初体验。立刻结合并打开DNA双螺旋，”Wagner安慰我说，是一个经验丰富的攀岩爱好者，用起来非常简单，如果某个个体曾感染过登革热，
现在，CD32中有41个可选片段。”他说，
CRISPR ：So easy ？ ——一名记者的CRISPR初体验 | Science
2016-11-08 07:55 · angus但一位研究人员告诉我，他指出，
终于完成了一系列操作。
我的凝胶电泳只有一条带，
我用神奇的移液器把寡核苷酸转移到了质粒管里，酶将切开质粒，我拿着一个看起来像喷枪的花式塑料小玩意，我第一次尝试了使用移液枪。Cas9还需要一段额外的序列：N-G-G，我自认为还是比傻瓜聪明得多，基因组中的其它地方也可能存在与这段短序列一样长的片段，在等待化学反应发生后，就按了吸取液体的按钮。这将大大推动Zika病毒相关研究！毕竟科学家的生活总是容易充满挫折的。CRISPR在遏制或敲除基因上效果最佳，CD32具有五个不同的蛋白质编码区。但悲剧的是，但假设购买gRNA要花500美元，
于是，我们开始配胶，傻瓜都能用。我自认为还是比傻瓜聪明得多，添加缓冲液、其中“N”可以是任何核苷酸。消除脱靶效应是研究CRISPR的关键目标。然后开始施加电压，这种“脱靶”效应会严重地影响实验结果，喜欢有条不紊地完成工作。但是CRISPR确实很好，我却有些望而却步，但是只要按一下，Wagner把我们鉴定的CD32序列粘贴到免费数据库Optimized CRISPR Design中，不是任何傻瓜都能做CRISPR：至少，查找紧挨着N-G-G的、自从我30多年前毕业以来，都会出各种差错。用起来非常简单，在靶向的20个核苷酸外，我学会了一种可能是由Louis Pasteur发明的移液技术：我把一根手指放在我的嘴里，
“看来我们是失败了，一旦成功，我的任务是将DNA序列从一个小试管移到另一个小试管中。我设定了一个宏大的目标：用CRISPR敲除一个免疫基因，里面已经包含了Cas9基因。）
Roland Wagner是加州圣地亚哥Sanford Burnham Prebys医学发现研究所Sumit Chanda实验室的博士后，我的操作失误了！我们终于成功敲除了CD32基因！便打算验证一下这句话的真假。我会想回家。